1.試劑盒保存:-20℃(較長時間不用時);2-8℃(頻繁使用時)。
2.濃洗滌液低溫保存會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。
3.中、英文說明書可能會有不一致之處,請以英文說明書為準。
4.剛開啟的酶聯板孔中可能會含有少許水樣物質,此為正常現象,不會對實驗結果造成任何影響。 ELISA的基本原理有三條: (1)抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面,可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水性部分相互吸附,并保持其免疫學活性; (2)抗原或抗體可通過共價鍵與酶連接形成酶結合物,而此種酶結合物仍能保持其免疫學和酶學活性; (3)酶結合物與相應抗原或抗體結合后,可根據加入底物的顏色反應來判定是否有免疫反應的存在,而且顏色反應的深淺是與標本中相應抗原或抗體的量成正比例的,因此,可以按底物顯色的程度顯示試驗結果。
1. 酶聯板(Assay plate ):一塊(96孔)。
2. 標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4. 生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。歡迎客戶咨詢產品展臺:http://www.cnfnv.com/c75664/技術咨詢與文章下載:http://www.shbmd.com/
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PCDH1elisa試劑盒使用說明書現貨供應,價格優惠,質量保證,提供96T和48T兩種規格檢測試劑盒,僅供科研使用,不得用于臨床,使用前請仔細閱讀產品說明書。
產品名稱:PCDH1elisa試劑盒使用說明書
英文名稱:PCDH1
性狀:盒裝液體。
產品名稱保存溫度: 2~8℃。
檢測范圍:見說明書靈敏度(以隨貨英文說明書為主)。
說明書:說明書隨貨發送,您也可以直接聯系我司在線銷售人員索取。
運輸:快遞運輸(可根據客戶要求,選擇具體的運輸方式,無特殊要求我公司一般為中通或韻達)
PCDH1elisa試劑盒使用說明書雙抗體夾心法:
1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃ 孵育1小時。然后洗滌(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3、加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~1小時,洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
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GOY-2895豬B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒特價促銷英文名稱:Porcine B-cell leukemia/lymphoma 2,Bcl-2 ELISA Kit規格:96T/48T
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GOY-2919豬肺表面活性物質相關蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒特價促銷英文名稱:Porcine Pulmonary surfatcant-associated protein A,SP-A ELISA Kit規格:96T/48T
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Elisa試劑盒操作方法:雙抗體夾心法/間接法,比較常用的是雙抗體夾心法。
在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:1.固相載體的選擇;2.包被抗體(或抗原)的選擇;3.酶標記抗體工作濃度的選擇;4.酶的底物及供氫體的選擇.
用途:科研實驗等領域科學研究,不得用于臨床診斷.
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其他產品:http://www.microscopesprofessional.com:倒置金相顯微鏡,http://www.jimikit.com:測試盒,http://www.yshuashuo.com:伸縮式絲杠防護罩,http://www.zhefengpv.com:橡膠瓣止回閥,http://www.nfc9180.cc:高頂燈,http://www.hyxsyb.com:電量變送器,http://www.hepuyq.com:循環水式真空泵,http://www.moma17.com:大容量搖床,http://www.jinyi17.com:恒溫金屬浴,http://www.jingcheng17.com:橡膠無轉子硫化儀
產品詳細介紹:人血管生成素樣蛋白4 elisa試劑盒
使用目的: 人血管生成素樣蛋白4 ELISA試劑盒 用于測人血清 人血漿 及相關液體樣本中人血管生成素樣蛋白4 的含量。
實驗原理:于標記的酶:用于標記抗體或抗抗體的酶須具有下列特性:有高度的活性和敏感性;在室溫下穩定;反應產物易于顯現;能商品化生產。目前應用較多的有辣根過氧化物酶(HRP)、堿性磷酸酶、葡萄糖氧化酶等,其中以HRP應用最廣。1.辣根過氧化物酶(HRP) 過氧化物酶廣泛分布于植物中,辣根中含量最高,從辣根中提取的稱辣根過氧化物酶(HRP),是由無色酶蛋白和深棕色的鐵卟啉構成的一種糖蛋白(含糖量18%),分子量約40 000,約由300個氨基酸組成,等電點為pH 3-9,催化反應的最適pH值因供氫體不同而稍有差異,一般多在pH 5左右。此酶溶于水和50%飽和度以下的硫酸銨溶液。酶蛋白和輔基的最大吸收光譜分別為275nm和403nm。酶的純度以RZ表示:RZ=OD403/OD275純酶的RZ多在3.0以上,最高為3.4。RZ在0.6以下的酶制品為粗酶,非酶蛋白約占 75%,不能用于標記。RZ在2.5以上者方可用于標記。HRP的作用底物為過氧化氫,催化反應時的供氫體有幾種:(1)鄰苯二胺(OPD),產物為橙色,可溶性,敏感性高,最大吸收值在490nm,可用肉眼觀察判別,容易被濃硫酸終止反應,顏色可在數小時內不改變,是目前國內ELISA(酶聯免疫吸附試驗,酶聯免疫試劑盒)中最常用的一種;(2)聯大茴香胺(OD),產物為橘黃色,最大吸收值在400nm,顏色較穩定;(3)5-氨基水楊酸(5-AS):產物為深棕色,最大吸收值在449nm,部分溶解,敏感性較差;(4)鄰聯甲苯胺(OT)產物為藍色,最大吸收值在630nm,部分溶解,不穩定,不耐酸,但反應快,顏色明顯。2.堿性磷酸酶 系從小牛腸粘膜和大腸桿菌中提取,由多個同功酶組成。它們的底物種類很多,常用者為硝基苯磷酸鹽,廉價無毒性。酶解產物呈黃色,可溶,最大吸收值在400nm。酶的活性以在pH10反應系統中,37℃1分鐘水解1μg磷酸苯二鈉為一個單位。
人血管生成素樣蛋白4 ELISA試劑盒
大鼠骨保護素(OPG)ELISA試劑盒 說明書
本試劑僅供研究使用 標本:血清或血漿
試驗原理:TGF-β1 試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知TGF-β1 濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將TGF-β1 和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中TGF-β1 的濃度呈比例關系。
試劑盒內容及其配制
試劑盒成份(2-8℃保存) 96孔配置 48孔配置 配制96/48人份酶標板 1塊板(96T) 半塊板(48T) 即用型塑料膜板蓋 1塊 半塊 即用型標準品:400pmol/L 1瓶(0.6ml) 1瓶(0.3ml) 按說明書進行稀稀空白對照 1瓶(1.0ml) 1瓶(0.5ml) 即用型標準品稀釋緩沖液 1瓶(5ml) 1瓶(2.5ml) 即用型生物素標記的抗TGF-β1 抗體 1瓶(6ml) 1瓶(3.0ml) 即用型親和鏈酶素-HRP 1瓶(10ml) 1瓶(5.0ml) 即用型洗滌緩沖液 1瓶(20ml) 1瓶(10ml) 按說明書進行稀釋底物A 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型底物B 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型終止液 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型標本稀釋液 1瓶(12ml) 1瓶(6.0ml) 即用型
自備材料1. 蒸餾水。2. 加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3. 振蕩器及磁力攪拌器等。
安全性1. 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。2. 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
操作注意事項1. 試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。2. 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。3. 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。4. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。5. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6. 洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。7. 底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。8. 加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。9. 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
樣品收集、處理及保存方法1、 血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2、 血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、 細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、 組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液5、 保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
試劑的準備1. 標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行:400 pmol/L (6號標準品) 原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。200 pmol/L (5號標準品) 100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液100 pmol/L (4號標準品) 100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液50 pmol/L (3號標準品) 100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液25 pmol/L (2號標準品) 100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液12.5 pmol/L (1號標準品) 100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液0 pmol/L (空白對照) 原始濃度不用稀釋直接加入50ul。
2. 洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。
操作步驟1. 使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。2. 根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內。3. 加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。4. 甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。5. 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。6. 甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。7. 每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。8. 取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。9. 在450nm波長處測定各孔的OD值。
建議使用的實驗方案 標準品濃度(pmol/L) A 400 400 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品B 200 200 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品C 100 100 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品D 50 50 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品E 25 25 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品F 12.5 12.5 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品G 0 0 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品H 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
局限6號標準品以上的結果為非線性的,根據此標準曲線無法得到精確的結果。
試劑盒性能1. 靈敏度:最小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。2. 特異性:不與其它細胞因子反應。3. 重復性:板內、板間變異系數均小于10%。
結 果 判 斷 與 分 析1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的TGF-β1 標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的TGF-β1 含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。
3、檢測值范圍:0-400pmol/L
4、敏感度: 1.0 pmol/L