細(xì)胞核蛋白與細(xì)胞漿蛋白抽提試劑盒是通過(guò)細(xì)胞漿蛋白抽提試劑 a 和 b,在低滲透壓條件下,使細(xì)胞充分膨脹,然后破壞細(xì)胞膜,釋放 出細(xì)胞漿蛋白,然后通過(guò)離心得到細(xì)胞核沉淀。最后通過(guò)高鹽的細(xì)胞核蛋白抽提試劑抽提得到細(xì)胞核蛋白。
使用膜再生液可以對(duì)同張膜進(jìn)行多次 western blot 檢測(cè)。在室溫條件下,將用過(guò)的膜浸泡在膜再生液 10-60 分鐘,可在不影響抗原蛋白的情況下清除膜上結(jié)合的抗體。隨后,可以使用不同的抗體進(jìn)行下輪 western blot 實(shí)驗(yàn)。適宜從少量樣品多次檢測(cè)不同蛋白質(zhì)。即使樣品量并不匱乏,采用這策略多次檢測(cè)同